中國藥典2015年版規定純化水微生物限度檢查：取本品不少于 1ml。美國藥典(USP)歐洲藥典(EP)中都是取10ml混合均勻的水樣。還有人說(shuō)過(guò)濾100ml更適合反映真實(shí)的情況。

　　過(guò)濾的越多越能體現真實(shí)的微生物限度水平，這是基本的共識。但是便于之后的計數是我們不得不考慮的內容。一般來(lái)說(shuō)在每個(gè)平板上形成30~300個(gè)菌落屬于有效計數范圍。如果過(guò)濾體積過(guò)大，濾膜上的菌落超過(guò)300cfu就會(huì )有邊界模糊的現象造成無(wú)法準確計數。有些公司的微孔濾膜上會(huì )帶有方格，一般為180-200個(gè)左右，就是為了方便計數。

　　那我們到底要過(guò)濾多少體積呢?最好結合本公司的純化水的微生物限度值歷史數據水平盡量多過(guò)。極端的說(shuō)，如果你公司純化水歷史數據都是0，那可以取多少純化水過(guò)濾多少。如果從純化水的微生物限度標準(1ml需氧菌總數不得過(guò)100cfu)來(lái)說(shuō)，過(guò)濾3ml比較合適，只要在合格范圍以?xún)?，每膜不超過(guò)300cfu方便計數。折中的情況，過(guò)濾10ml是比較多的選擇，但是如果你公司的純化水歷史數據維持在30cfu/ml以上，過(guò)濾10ml的話(huà)膜上會(huì )長(cháng)出300cfu以上的菌落，就太多了不好計數了。

　　如果取10ml,兩片膜共長(cháng)1000個(gè)菌以下并不定是不合格的。因為取水10ml,只能每次取5ml, .各用于兩片膜的過(guò)濾，每張膜只能培養出細菌或霉菌，不能同時(shí) 出細菌和霉菌，所以結果計算時(shí)體積只能算5ml, 按5ml計，兩片膜有1000 個(gè)，則每1ml有200個(gè)了所以應判為不合格，.只有在500個(gè)以下才能算合格的。

　　應該說(shuō)05年版藥典的標準比00年更為合理，因為采用薄膜過(guò)濾法，取樣量可以加大(平板法時(shí)取1ml),更態(tài)培養微生物，對于檢驗更有代表性。二般不可能平板計數法不合格，而采用過(guò)濾法確熊合格，取樣曩加太卮境養出微生物的機率更大e若相反要竟一下愿因:是不是檢測有問(wèn)題。

　　采用薄膜過(guò)濾法可以通過(guò)驗證來(lái)確定取樣量，也并不一 定取5-10ml,若純化水中含微生物量較少，則取樣量可加大，但不能培養出太多菌落導致無(wú)法點(diǎn)計，影響計數結果。若含微生物較多，則取用量可減少，總之，在不影響計數的前提下，盡可能加大取樣量。另采用薄膜過(guò)濾法可以不必加無(wú)菌水稀釋?zhuān)苯訛V過(guò)即可。

　　再多說(shuō)一句，為了取樣有代表性，國外藥典中要求的混合均勻是好的操作。