微生物限度檢查計數方法有哪些，一文詳細為您介紹。

　　1、基本計數方法

　　計數方法包括平皿法和薄膜過(guò)濾法。檢查時(shí)，按已驗證的計數方法進(jìn)行供試品的細菌、霉菌及酵母菌菌數的測定。按計數方法的驗證試驗確認的程序進(jìn)行供試液制備。用稀釋液稀釋成1 : 10、1:100、1:1000 等稀釋級的供試液。

　　(1)平皿法

　　1)常規法:

　　取經(jīng)驗證的低稀釋級的供試液lml，置直徑90mm的無(wú)菌平皿中，注入15~ 20ml溫度不超過(guò)45 °C的融化的營(yíng)養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基，混勻，凝固，倒置培養。每稀釋級每種培養基至少制備2個(gè)平板。

　　2)培養基稀釋法:取經(jīng)驗證的低稀釋級的供試液lml，等量分注于2個(gè)(2.皿法，每皿0.5ml)、5個(gè)(5皿法，每IL.O.2ml)或10個(gè)(10皿法，每M0.1ml)直徑90mm的無(wú)菌平皿中，其它同上。

　　陰性對照試驗取試驗用的稀釋液lml,置無(wú)菌平皿中，注入培養基，凝固，倒置培養。每種計數用的培養基各制備2個(gè)平板，均不得有菌生長(cháng)。

　　2、薄膜過(guò)濾法

　　采用薄膜過(guò)濾法，一般采用微生物限度檢測儀濾膜孔徑應不大于0.45um,直徑一般為50mm ，若采用其他直徑的濾膜.沖洗量應進(jìn)行相應的調整。

　　選擇濾膜材質(zhì)時(shí)應保證供試品及其溶劑不影響微生物的充分被截留。濾器及濾膜使用前應采用適宜的方法滅菌。使用時(shí)，應保證濾膜在過(guò)濾前后的完整性。

　　水溶性供試液過(guò)濾前先將少量的沖洗液過(guò)濾以潤濕濾膜。油類(lèi)供試品，其濾膜和濾器在使用前應充分干燥。

　　為發(fā)揮濾膜的最大過(guò)濾效率，應注意保持供試品溶液及沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜表面。

　　供試液經(jīng)薄膜過(guò)濾后，若需要用沖洗液沖洗濾膜，每張濾膜每次沖洗量為100ml?？倹_洗量不得超過(guò)1000ml,，以避免濾膜上的微生物受損傷。

　　取相當于每張濾膜含lg、lml或10ccm2供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過(guò)濾。若供試品每1g、lml 或10 cm2所含的菌數較多時(shí)，可取適宜稀釋級的供試液lml進(jìn)行試驗。用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計數方法的驗證”。

　　沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營(yíng)養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備:張濾膜。

　　陰性對照試驗：取試驗用的稀釋液1ml,照上述薄膜過(guò)濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長(cháng)。

　　(2)培養和計數

　　培養條件和計數方法同平皿法，每片濾膜上的菌落數應不超過(guò)100cfu。